Gram stain: ทำอย่างไรและมีไว้เพื่ออะไร

เนื้อหา

• วิธีทำคราบแกรม
• มีไว้ทำอะไร

Gram stain หรือเพียงแค่ Gram เป็นเทคนิคที่ง่ายและรวดเร็วซึ่งมีจุดมุ่งหมายเพื่อแยกความแตกต่างของแบคทีเรียตามลักษณะของผนังเซลล์หลังจากสัมผัสกับสีย้อมและสารละลายต่างๆ

ดังนั้นด้วยวิธีการย้อมสีแกรมจึงเป็นไปได้ที่จะตรวจสอบนอกเหนือจากรูปร่างของแบคทีเรียสีที่ได้รับและผลลัพธ์นี้มีความสำคัญต่อการกำหนดกลยุทธ์อื่น ๆ ในการระบุชนิดของแบคทีเรียและเพื่อให้แพทย์ระบุการรักษาเชิงป้องกัน ตามลักษณะที่สังเกตได้ด้วยกล้องจุลทรรศน์

การย้อมสีแกรมมักทำในห้องปฏิบัติการเป็นประจำและเป็นส่วนหนึ่งของการตรวจสอบสำเนาแบคทีเรีย ทำความเข้าใจว่า bacterioscopy คืออะไรและทำอย่างไร

วิธีทำคราบแกรม

Gram stain เป็นวิธีที่รวดเร็วใช้งานได้จริงและราคาไม่แพงในการระบุแบคทีเรียที่เป็นสาเหตุของการติดเชื้อซึ่งมีประโยชน์สำหรับแพทย์ในการระบุแนวทางป้องกันการติดเชื้อที่อาจเกิดขึ้นเนื่องจากทราบลักษณะเฉพาะของกลุ่มแบคทีเรียเหล่านี้

การย้อมสีแกรมทำได้ใน 7 ขั้นตอนหลักอย่างไรก็ตามโปรโตคอลอาจแตกต่างกันไปขึ้นอยู่กับห้องปฏิบัติการ:

1. วางโคโลนีของแบคทีเรียไว้บนสไลด์โดยเติมน้ำลงไปเพื่อให้โคโลนีเป็นเนื้อเดียวกัน
2. ปล่อยให้แห้งเล็กน้อยและใบมีดสามารถผ่านเปลวไฟได้อย่างรวดเร็วเพื่อช่วยในการอบแห้งอย่างไรก็ตามสิ่งสำคัญคือต้องใส่ใจกับอุณหภูมิเนื่องจากหากอุณหภูมิสูงเกินไปอาจเป็นไปได้ว่ามีการเปลี่ยนแปลงในโครงสร้างของ แบคทีเรียซึ่งอาจรบกวนผลการสอบ
3. เมื่อสไลด์แห้งให้คลุมด้วยสีย้อมคริสตัลไวโอเล็ตแล้วปล่อยทิ้งไว้ประมาณ 1 นาที
4. ล้างสไลด์ด้วยกระแสน้ำไหลและปิดสไลด์ด้วยลูโกลซึ่งมีวัตถุประสงค์ในการย้อมสีฟ้าและปล่อยให้มันทำงานเป็นเวลา 1 นาที แบคทีเรียทั้งสองชนิดสามารถดูดซับคอมเพล็กซ์ที่เกิดจากสีย้อมและลูโกลเปลี่ยนเป็นสีน้ำเงิน
5. จากนั้นล้างสไลด์ด้วยน้ำไหลและทาแอลกอฮอล์ 95% ทิ้งไว้ 30 วินาที แอลกอฮอล์มีหน้าที่ในการละลายเยื่อหุ้มไขมันที่ก่อตัวเป็นแบคทีเรียแกรมลบดังนั้นการขจัดความซับซ้อนที่เกิดขึ้นระหว่างสีย้อมและลูโกลทำให้แบคทีเรียเหล่านี้เปลี่ยนสี อย่างไรก็ตามในกรณีของแบคทีเรียแกรมบวกแอลกอฮอล์จะคายน้ำที่ผนังเซลล์ของแบคทีเรียแกรมบวกทำให้รูขุมขนหดตัวและทำให้ไม่สามารถซึมผ่านได้
6. จากนั้นล้างในน้ำไหลอีกครั้งและคลุมสไลด์ด้วยสีย้อมที่สองฟูซินหรือซาฟรานินแล้วปล่อยทิ้งไว้ 30 วินาที
7. จากนั้นล้างสไลด์ด้วยน้ำไหลและปล่อยให้แห้งที่อุณหภูมิห้อง

ทันทีที่สไลด์แห้งคุณสามารถหยดน้ำมันแช่และสังเกตสไลด์ใต้กล้องจุลทรรศน์โดยมีวัตถุประสงค์ 100x ซึ่งเป็นไปได้ที่จะตรวจสอบว่ามีหรือไม่มีแบคทีเรียตลอดจนการปรากฏตัวของยีสต์และเยื่อบุผิว เซลล์.

มีไว้ทำอะไร

การย้อมสีแกรมมีวัตถุประสงค์หลักในการแยกความแตกต่างของแบคทีเรียตามลักษณะของผนังเซลล์และสัณฐานวิทยาทั่วไป ดังนั้นตามลักษณะที่สังเกตได้ภายใต้กล้องจุลทรรศน์แบคทีเรียสามารถแบ่งออกเป็น:

• แบคทีเรียแกรมบวกซึ่งมองเห็นเป็นสีฟ้าเนื่องจากแอลกอฮอล์ไม่ได้เปลี่ยนสีเนื่องจากมีผนังเซลล์หนาขึ้นและรูขุมขนหดตัวเมื่อสัมผัสกับ lugol
• แบคทีเรียแกรมลบซึ่งมองเห็นเป็นสีชมพู / ม่วงเนื่องจากมีการเปลี่ยนสีด้วยแอลกอฮอล์และย้อมด้วยซาฟรานินหรือฟูซิน

หลังจากดูแบคทีเรียภายใต้กล้องจุลทรรศน์แล้วมีความเป็นไปได้ที่จะทำการทดสอบเพิ่มเติมในห้องปฏิบัติการเพื่อระบุชนิดของแบคทีเรีย อย่างไรก็ตามด้วยวิธีแกรมและการเชื่อมโยงกับอาการและอาการแสดงที่นำเสนอโดยบุคคลนั้นแพทย์สามารถระบุการรักษาเชิงป้องกันได้จนกว่าจะได้ผลการตรวจที่เฉพาะเจาะจงมากขึ้นเนื่องจากวิธีนี้จะสามารถลดอัตราการจำลองแบบของแบคทีเรียและป้องกันภาวะแทรกซ้อนได้