Electrophoresis มันคืออะไรมีไว้เพื่ออะไรและทำอย่างไร

เนื้อหา

• มีไว้ทำอะไร
• วิธีการทำ
• ประเภทของอิเล็กโทรโฟรีซิส
• 1. ฮีโมโกลบินอิเล็กโทรโฟรีซิส
• 2. โปรตีนอิเล็กโทรโฟรีซิส

Electrophoresis เป็นเทคนิคในห้องปฏิบัติการที่ดำเนินการโดยมีวัตถุประสงค์เพื่อแยกโมเลกุลตามขนาดและประจุไฟฟ้าเพื่อให้สามารถวินิจฉัยโรคได้สามารถตรวจสอบการแสดงออกของโปรตีนหรือสามารถระบุจุลินทรีย์ได้

Electrophoresis เป็นขั้นตอนที่ง่ายและต้นทุนต่ำซึ่งใช้ในห้องปฏิบัติการประจำและในโครงการวิจัย ตามวัตถุประสงค์ของอิเล็กโตรโฟรีซิสอาจจำเป็นต้องทำการทดสอบและการสอบอื่น ๆ เพื่อให้ได้การวินิจฉัยเป็นต้น

มีไว้ทำอะไร

Electrophoresis สามารถทำได้เพื่อวัตถุประสงค์ที่แตกต่างกันทั้งในโครงการวิจัยและในการวินิจฉัยเนื่องจากเป็นเทคนิคที่ง่ายและต้นทุนต่ำดังนั้นจึงสามารถทำการอิเล็กโทรโฟเรซิสเพื่อ:

• ระบุไวรัสเชื้อราแบคทีเรียและปรสิตโดยแอปพลิเคชันนี้พบได้ทั่วไปในโครงการวิจัย
• การทดสอบความเป็นบิดา;
• ตรวจสอบการแสดงออกของโปรตีน
• ระบุการกลายพันธุ์ซึ่งมีประโยชน์ในการวินิจฉัยโรคมะเร็งเม็ดเลือดขาวเช่น
• วิเคราะห์ชนิดของฮีโมโกลบินหมุนเวียนซึ่งมีประโยชน์ในการวินิจฉัยโรคโลหิตจางชนิดเคียว
• ประเมินปริมาณโปรตีนที่มีอยู่ในเลือด

ตามวัตถุประสงค์ของอิเล็กโทรโฟเรซิสอาจจำเป็นต้องทำการทดสอบเสริมอื่น ๆ เพื่อให้แพทย์ทำการวินิจฉัยให้สมบูรณ์

วิธีการทำ

ในการทำอิเล็กโทรโฟรีซิสจำเป็นต้องใช้เจลซึ่งอาจเป็นโพลีอะคริลาไมด์หรืออะกาโรสขึ้นอยู่กับวัตถุประสงค์บัฟเฟอร์อิเล็กโตรโฟรีซิสและถังเครื่องหมายน้ำหนักโมเลกุลและสีย้อมเรืองแสงนอกเหนือจากอุปกรณ์แสง UV หรือ LED หรือที่เรียกว่า transilluminator

หลังจากเตรียมเจลแล้วจะต้องวางวัตถุเฉพาะเพื่อให้หลุมทำในเจลที่นิยมเรียกว่าหวีแล้วปล่อยให้เจลเซ็ตตัว เมื่อเจลพร้อมแล้วให้ใช้สารกับบ่อน้ำ สำหรับสิ่งนี้ต้องวางเครื่องหมายน้ำหนักโมเลกุลไว้ในหลุมใดหลุมหนึ่งการควบคุมเชิงบวกซึ่งเป็นสารที่รู้ว่ามันคืออะไรการควบคุมเชิงลบซึ่งรับประกันความถูกต้องของปฏิกิริยาและตัวอย่างที่จะวิเคราะห์ ตัวอย่างทั้งหมดจะต้องผสมกับสีย้อมเรืองแสงเนื่องจากวิธีนี้จะทำให้เห็นภาพของแถบบนทรานซิลลูมิเนเตอร์ได้

เจลที่มีตัวอย่างจะต้องวางไว้ในถังอิเล็กโตรโฟรีซิสซึ่งมีสารละลายบัฟเฟอร์เฉพาะจากนั้นอุปกรณ์จะเปิดขึ้นเพื่อให้มีกระแสไฟฟ้าและด้วยเหตุนี้ความต่างศักย์ซึ่งเป็นสิ่งสำคัญสำหรับอนุภาคแยกตาม โหลดและขนาด เวลาในการทำงานของ electrophoretic แตกต่างกันไปตามวัตถุประสงค์ของขั้นตอนและอาจนานถึง 1 ชั่วโมง

หลังจากเวลาที่กำหนดคุณสามารถดูผลลัพธ์ของการทำงานของอิเล็กโทรโฟเรติกผ่านทรานซิลลูมิเนเตอร์ เมื่อวางเจลไว้ภายใต้แสง UV หรือ LED จะสามารถมองเห็นรูปแบบแถบได้: ยิ่งโมเลกุลมีขนาดใหญ่การอพยพก็ยิ่งน้อยลงการเข้าใกล้บ่อน้ำมากขึ้นในขณะที่โมเลกุลที่มีน้ำหนักเบายิ่งมีศักยภาพในการอพยพมากขึ้น

สำหรับปฏิกิริยาที่จะได้รับการตรวจสอบความถูกต้องจะต้องมองเห็นแถบของการควบคุมเชิงบวกและไม่มีสิ่งใดที่ต้องมองเห็นได้ในการควบคุมเชิงลบมิฉะนั้นจะเป็นการบ่งชี้ว่ามีการปนเปื้อนและต้องทำซ้ำกระบวนการทั้งหมด

ประเภทของอิเล็กโทรโฟรีซิส

Electrophoresis สามารถทำได้เพื่อวัตถุประสงค์ที่แตกต่างกันและตามวัตถุประสงค์สามารถใช้เจลได้หลายประเภทที่พบมากที่สุดคือ polyacrylamide และ agarose

Electrophoresis เพื่อระบุจุลินทรีย์เป็นเรื่องปกติที่จะดำเนินการในห้องปฏิบัติการวิจัยอย่างไรก็ตามเพื่อวัตถุประสงค์ในการวินิจฉัยสามารถใช้อิเล็กโทรโฟเรซิสเพื่อระบุโรคทางโลหิตวิทยาและโรคที่มีวิวัฒนาการไปพร้อมกับการเพิ่มขึ้นของปริมาณโปรตีนซึ่งเป็นประเภทหลักของอิเล็กโทร

1. ฮีโมโกลบินอิเล็กโทรโฟรีซิส

ฮีโมโกลบินอิเล็กโทรโฟเรซิสเป็นเทคนิคในห้องปฏิบัติการที่ดำเนินการเพื่อระบุชนิดของฮีโมโกลบินที่หมุนเวียนอยู่ในเลือดทำให้สามารถระบุโรคที่เกี่ยวข้องกับการสังเคราะห์ฮีโมโกลบินได้ ชนิดของฮีโมโกลบินถูกระบุโดยวิธีการอิเล็กโทรโฟรีซิสที่ pH เฉพาะซึ่งควรเป็นระหว่าง 8.0 ถึง 9.0 โดยมีรูปแบบของแถบที่สามารถเปรียบเทียบได้กับรูปแบบปกติทำให้สามารถระบุฮีโมโกลบินที่ผิดปกติได้

ทำมาเพื่ออะไร: ฮีโมโกลบินอิเล็กโทรโฟเรซิสทำเพื่อตรวจสอบและวินิจฉัยโรคที่เกี่ยวข้องกับการสังเคราะห์ฮีโมโกลบินเช่นโรคโลหิตจางชนิดเคียวและโรคฮีโมโกลบินซีนอกจากจะมีประโยชน์ในการแยกธาลัสซีเมีย เรียนรู้วิธีตีความอิเล็กโทรโฟรีซิสของฮีโมโกลบิน

2. โปรตีนอิเล็กโทรโฟรีซิส

โปรตีนอิเล็กโทรโฟเรซิสคือการตรวจที่แพทย์ร้องขอเพื่อประเมินปริมาณโปรตีนที่ไหลเวียนในเลือดและเพื่อระบุโรค การตรวจนี้ทำจากตัวอย่างเลือดซึ่งถูกปั่นแยกเพื่อให้ได้พลาสมาซึ่งเป็นส่วนของเลือดซึ่งประกอบด้วยสารอื่น ๆ ของโปรตีน

หลังจากอิเล็กโทรโฟรีซิสสามารถมองเห็นรูปแบบของแถบและต่อมาคือกราฟที่ระบุปริมาณของโปรตีนแต่ละส่วนซึ่งเป็นพื้นฐานสำหรับการวินิจฉัย

ทำมาเพื่ออะไร: โปรตีนอิเล็กโทรโฟเรซิสช่วยให้แพทย์สามารถตรวจสอบการเกิด multiple myeloma การขาดน้ำโรคตับแข็งการอักเสบโรคตับตับอ่อนอักเสบโรคลูปัสและความดันโลหิตสูงตามรูปแบบแถบและกราฟที่แสดงในรายงานการตรวจ

ทำความเข้าใจว่ามันทำอย่างไรและจะเข้าใจผลลัพธ์ของโปรตีนอิเล็กโทรโฟเรซิสได้อย่างไร